Padronização de teste para quantificar anticorpos anti-poliovírus utilizando vírus vacinal / Standardization of a test for quantifying the antibodies against poliovirus using the vaccine virus

A poliomielite é uma doença endêmica no Afeganistão e no Paquistão, apesar dos esforços para ser erradicada, representando uma ameaça para outros países principalmente devido às viagens internacionais. A Organização Mundial da Saúde (OMS) tem como objetivo erradicar a poliomielite causada pelo poliovírus selvagem no mundo. O requisito essencial para a erradicação da poliomielite é a eliminação da cepa do poliovírus selvagem, que é empregada no teste padrão-ouro. Com o intuito de auxiliar na erradicação do poliovírus selvagem, o objetivo deste estudo foi modificar o teste padrão-ouro usando o poliovírus derivado da vacina oral atenuada. Foram testados 63 soros pelo ensaio de neutralização utilizando-se antígenos vacinais. A concordância do sorotipo 1 (k=0,74) foi considerada substancial, enquanto o sorotipo 2 (k=1,00) e sorotipo 3 (k= 0,95) foram consideradas quase perfeitas. A sensibilidade dos testes de soroneutralização utilizando os sorotipos 1, 2 e 3 foi de 94,83%, 100,00% e 100,00%, respectivamente. Em conclusão, o ensaio com antígenos vacinais pode ser usado como procedimento laboratorial seguro, especialmente em estudos de vigilância em larga escala. (AU)

Poliomyelitis is an endemic disease in Afghanistan and Pakistan in despite of the efforts to eradicate it, and it represents a threat to other countries mainly due to the international trips. The World Health Organization (WHO) aims at eradicating the polio disease worldwide. An essential requirement for eradicating the poliomyelitis is the elimination of the wild poliovirus strain, which is employed in the gold standard test. As a support for the eradication of wild poliovirus, the present study aimed at modifying the gold standard test by using poliovirus derived from the oral attenuated vaccine. Sixty-three sera samples were tested by neutralization assay using vaccine antigens. The degree of agreement of the serotype 1 (k=0.74) was considered substantial, while the serotype 2 (k=1.00) and 3 (k= 0.95) showed almost perfect agreement. The sensitivity of serotypes 1, 2 and 3 was 94.83%, 100.00% and 100.00%, respectively. In conclusion, the assay with the vaccine antigens can be used as a safe application, especially for large-scale surveillance studies. (AU)

Padronização de teste para quantificar anticorpos anti-poliovírus utilizando vírus vacinal / Standardization of a test for quantifying the antibodies against poliovirus using the vaccine virus

A poliomielite é uma doença endêmica no Afeganistão e no Paquistão, apesar dos esforços para ser erradicada, representando uma ameaça para outros países principalmente devido às viagens internacionais. A Organização Mundial da Saúde (OMS) tem como objetivo erradicar a poliomielite causada pelo poliovírus selvagem no mundo. O requisito essencial para a erradicação da poliomielite é a eliminação da cepa do poliovírus selvagem, que é empregada no teste padrão-ouro. Com o intuito de auxiliar na erradicação do poliovírus selvagem, o objetivo deste estudo foi modificar o teste padrão-ouro usando o poliovírus derivado da vacina oral atenuada. Foram testados 63 soros pelo ensaio de neutralização utilizando-se antígenos vacinais. A concordância do sorotipo 1 (k=0,74) foi considerada substancial, enquanto o sorotipo 2 (k=1,00) e sorotipo 3 (k= 0,95) foram consideradas quase perfeitas. A sensibilidade dos testes de soroneutralização utilizando os sorotipos 1, 2 e 3 foi de 94,83%, 100,00% e 100,00%, respectivamente. Em conclusão, o ensaio com antígenos vacinais pode ser usado como procedimento laboratorial seguro, especialmente em estudos de vigilância em larga escala.

Poliomyelitis is an endemic disease in Afghanistan and Pakistan in despite of the efforts to eradicate it, and it represents a threat to other countries mainly due to the international trips. The World Health Organization (WHO) aims at eradicating the polio disease worldwide. An essential requirement for eradicating the poliomyelitis is the elimination of the wild poliovirus strain, which is employed in the gold standard test. As a support for the eradication of wild poliovirus, the present study aimed at modifying the gold standard test by using poliovirus derived from the oral attenuated vaccine. Sixty-three sera samples were tested by neutralization assay using vaccine antigens. The degree of agreement of the serotype 1 (k=0.74) was considered substantial, while the serotype 2 (k=1.00) and 3 (k= 0.95) showed almost perfect agreement. The sensitivity of serotypes 1, 2 and 3 was 94.83%, 100.00% and 100.00%, respectively. In conclusion, the assay with the vaccine antigens can be used as a safe application, especially for large-scale surveillance studies.

Avaliação do teste de aglutinação microscópica utilizando-se como antígeno leptospiras saprófitas para o diagnóstico da leptospirose humana / Evaluation of microscopic agglutination test using saprophytic leptospires for diagnosis of human leptospirosis

O objetivo deste trabalho foi avaliar a capacidade de efetuar o diagnóstico precoce do teste de aglutinação microscópica (MAT) utilizando-se como antígeno leptospiras saprófitas sorovar Patoc (MAT-Patoc). Neste contexto, os resultados obtidos em amostras de soro de casos confirmados de leptospirose foram comparados com aqueles obtidos no teste ELISA IgM. Cento e cinquenta e oito amostras colhidas na fase aguda da doença foram analisadas pelo MAT-Patoc. Os soros com títulos ≥ 50 foram considerados reagentes. A sensibilidade do MAT-Patoc e do ELISA-IgM foi de 13,29% e 28,48%, respectivamente. Nos sete primeiros dias da doença, o MAT-Patoc foi capaz de detectar 12,29% dos casos, enquanto o ELISA-IgM detectou 24,59%. O MAT-Patoc foi reagente em amostras de casos cujos prováveis sorogrupos infectantes foram Icterohaemorrhagiae, Cynopteri e Ballum. Em conclusão, a utilização do teste MAT-Patoc apresentou menor sensibilidade no diagnóstico quando comparado ao ELISA-IgM, embora tenha sido reagente em algumas amostras com resultado não reagente. O MAT-Patoc deve ser utilizado em combinação com ELISA-IgM para melhorar a sensibilidade do diagnóstico de leptospirose na primeira fase da doença, com subsequente confirmação pelo MAT de referência.

The aim of this study was to evaluate the early detection of antibodies by the microscopic agglutination test (MAT) using saprophytic leptospira serovar Patoc (MAT-Patoc), in serum samples from patients with confirmed leptospirosis. The obtained results were compared with those found in ELISA-IgM. A hundred fifty-eight serum samples collected from patients in acute phase of illness were analysed by MAT-Patoc. Samples with titers ≥ 50 were considered positive. The sensitivity of MAT-Patoc and IgM-ELISA was 13.29 % and 28.48 %, respectively. In the first seven days of the disease, MAT-Patoc was positive in 12.29 % of the cases, while the IgM-ELISA was positive in 24.59 %. The MAT-Patoc was positive in sera from confirmed cases, and the infecting serogroups were Icterohaemorrhagiae, Cynopteri and Ballum. In conclusion, the use of MAT-Patoc test showed lower sensitivity for diagnosing leptospirosis when compared with ELISA-IgM, although positive reactivity was found in some samples with negative results. The MAT-Patoc should be used in combination with ELISA-IgM to improve the sensitivity of the diagnosis of leptospirosis in the first phase of the disease, with subsequent confirmation by standard MAT.

Aseptic meningitis caused by Leptospira spp diagnosed by polymerase chain reaction

Leptospirosis is a zoonotic disease caused by the pathogenic Leptospira spp. The clinical presentations are diverse, ranging from undifferentiated fever to fulminant disease including meningeal forms. The neurological leptospirosis forms are usually neglected. The aim of this study was to investigate leptospirosis as the cause of aseptic meningitis using different diagnostic techniques including the polymerase chain reaction (PCR). Thirty-nine cerebrospinal fluid (CSF) samples from patients presenting with meningeal abnormalities, predominance of lymphocytes and negative results by traditional microbiological tests were processed by leptospiral culture, anti-leptospiral antibody response and PCR. Leptospira spp DNA was detected in 23 (58.97 percent) of the CSF samples. Anti-leptospiral antibodies were found in 13 (33.33 percent) CSF samples. Twelve CSF samples were positive by PCR assay and negative by microscopic agglutination test (MAT) assay. Two CSF samples were positive by MAT and negative by PCR. The positive and negative agreement between both tests was 11 and 14, respectively. CSF samples from six cases of unknown diagnosis were positive by PCR assay. Eight cases showed positive results using PCR and MAT. Leptospirosis could be detected by PCR assay from the 3rd-26th day after illness onset. The sensitivity of the PCR was assessed with confirmed cases of leptospirosis (by MAT) and found to be 89.5 percent. All CSFs were negative by culture. PCR was found to be a powerful tool for diagnosing meningitis cases of leptospirosis. We recommend that it may be used as a supplementary diagnostic tool, especially in the early stages of the disease, when other diagnostic techniques such as serology are not sensitive.

Human leptospirosis: a twenty-nine-year serological study in São Paulo, Brazil

Estudo retrospectivo com 9.335 casos de leptospirose humana no Estado de São Paulo, Brasil, diagnosticados entre 1969 e 1997 mostrou que a doença é endêmica no estado. Adultos com idade entre 20-39 anos foram os mais infectados (32,40 por cento) sendo 87,0 por cento dos casos do sexo masculino. A incidência anual média foi de 0,53 por uma população de 100.000. Casos ocorreram principalmente em janeiro a abril de cada ano. O maior número de casos foi observado em 1991 e 1996 com média pluviométrica de 159,9 e 160,3, respectivamente. Estes dados enfatizam a importância da leptospirose na saúde pública no Estado de São Paulo, Brasil.

Surto de leptospirose entre técnicos de laboratório do Campus da Universidade de Säo Paulo de Ribeiräo Preto - 1988 / Outbreak of leptospirosis among laboratory technicians at the campos of Säo Paulo University in Ribeiräo Preto - 1988

Os autores estudaram um surto de Leptospirose ocorrido entre técnicos manipuladores de animais experimentais no Campus da USP de Ribeiräo Preto em 1988. Nos meses de maio e junho foram notificados seis casos suspeitos de Leptospsirose naqueles profissionais, tendo sido confirmados clínica e laboratoriamente dois deles. A investigaçäo epidemiológica realizada constou de um inquérito sorológico em amostra de 347 animais do Biotério Geral do Campus; um inquérito sorológico entre 66 técnicos de laboratório considerados expostos ao risco de infecçäo (e mais 61 outras pessoas näo expostas ao risco tomadas como comparaçäo); além da pesquisa de roedores na área do Biotério e da investigaçäo domiciliar dos casos suspeitos. O resultado da investigaçäo mostrou soronegatividade em todos os animais de experimentaçäo reproduzidos em cativeiro, nos gatos e nos gambás; entretanto resultaram positivas 17% das amostras sorológicas dos cäes, 43% das amostras nos carneiros, além dos dois cavalos examinados. O inquérito sorológico entre técnicos manipuladores de animais evidenciou duas amostrs positivas (3%) no grupo exposto ao risco, enquanto no grupo tomado para comparaçäo todas as amostras resultaram negativas. A procura de sinais indicativos da presença de roedores domésticos näo demonstrou evidências desses animais nas instalaçöes do Biotério Geral, embora nelas houvesse possibilidade de comunicaçäo com o meio externo. Concluiu-se, diante das evidências encontradas (e levando-e em consideraçäo os antecedentes epidemiológicos sobre a ocorrência de Leptospirose entre técnicos do Campus da USP de Ribeiräo Preto) que embora näo tenha sido possível identificar a fonte de infecçäo de maneira inquestionável, esse grupo profissional deve ser considerado como grupo de risco em relaçäo à Leptospirose, e que seu local de trabalho constituiu-se no mais provável local de infecçäo, até prova em contrário